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本试剂盒基于Bst2.0 DNA聚合酶，是以DNA模板LAMP等温扩增反应的绝佳试剂，此外，本试剂盒还可以用于其它恒温扩增实验，包括CPA、SMAP等。

本试剂盒提供的2×ROY IsoAmp Buffer包含dNTPs、Mg²⁺、反应缓冲盐及ROY染料，用于红黄变色反应，扩增完毕后阳性样品为黄色，阴性样品为红色。

• Bst2.0 DNA Polymerase中含22%海藻糖，不含甘油，因此可用于建立LAMP引物mix与酶制品的冻干品，以提高LAMP检测制品的稳定性和易用性。
  
• 对成功建立LAMP检测方法至关重要的四个参数分别是：引物位置、引物使用浓度、反应温度（60～65℃）和反应时间。引物使用浓度、反应温度是优先要确认的参数，如经过参数调整后仍不能达到检测用标准，则重新设计引物组合，再进行测试。
  
• 在用于其它恒温扩增反应时（如CPA、SMAP等），可参考如下LAMP扩增策略进行，反应时间可能会需要调整。
  
• 关于矿物油的使用，在配制完LAMP反应体系后，可加入一滴矿物油覆盖于反应液上部，以减少气溶胶的污染。

• 按下表向0.2mL EP反应管中加入各成分配制反应体系
  

  成分	用量
  2×ROY IsoAmp Buffer	10μL
  Bst2.0 DNA Polymerase	2.5μL
  10×LAMP Primer Mix	2μL
  模板DNA	X μL
  ddH2O	至20μL

  • 10×LAMP Primer Mix浓度：FIP/BIP 16μM each、LoopF/B 4μM each、F3/B3 2μM each。
• 反应体系配好后，置于60～68℃（首次实验采用65℃）进行反应20～45min。
  
• 肉眼观察结果，黄色为阳性，红色为阴性。
  
  • ROY染料红黄变色反应依赖于反应体系中pH的变化来实现，因此模板中Tris盐、NaOH等成分对反应有至关重要的影响。在采用核酸纯化的样本检测时，推荐使用ddH2O进行洗脱，在使用粗制样本时建议使用ddH2O保存的样本进行检测。